制備液相色譜是色譜法的一個重要分支，以液體為流動相，采用高壓輸液系統，將具有不同極性的單一溶劑或不同比例的混合溶劑、緩沖液等流動相泵入裝有固定相的色譜柱，在柱內各成分被分離后，進入檢測器進行檢測，從而實現對試樣的分析。
制備液相色譜還有色譜柱可反復使用、樣品不被破壞、易回收等優點，但也有缺點，與氣相色譜相比各有所長，相互補充。液相色譜的缺點是有“柱外效應”。在從進樣到檢測器之間，除了柱子以外的任何死空間（進樣器、柱接頭、連接管和檢測池等）中，如果流動相的流型有變化，被分離物質的任何擴散和滯留都會顯著地導致色譜峰的加寬，柱效率降低。液相色譜檢測器的靈敏度不及氣相色譜。
在柱層析中，溶劑在重力作用下滴入裝有吸附劑的色譜柱中。液相色譜是一種改進的柱色譜。在高達400個大氣壓的高壓下，泵輸送溶劑通過色譜柱。柱吸附劑或固定相通常是由固體顆粒（如二氧化硅或聚合物）制成的顆粒材料。
與柱色譜相比，利用泵輸送，不僅可以快速分析，而且可以使用更小的顆粒作為柱填料。粒子越小，其表面積更大，通過固定相與流動相及樣品組分之間的相互作用，可以更好地實現混合物中各組分分離。流動相通常是溶劑（如水、乙腈、甲醇）的混合物。
提高液相色譜中柱效的有效途徑有：減小填料粒徑，增加色譜柱長，使用盡量大小均一、外型規則的填料，使用合適的流速，使用合適的流動相組成，使用合適的固定相。
